转基因老鼠_范文大全

转基因老鼠

【范文精选】转基因老鼠

【范文大全】转基因老鼠

【专家解析】转基因老鼠

【优秀范文】转基因老鼠

问题一:转基因小鼠和knock in/out小鼠有什么区别

转基因是过表达原有基因或者新表达原来没有的基因。

knockin是改变原有基因的表达,基本上是做突变,但是不破坏原有基因的完整性,

但是改变该基因的功能。

而knockout是敲除该基因,即是原有基因失活,其中又有保留原基因部分完整性和

不保留两种, 保留完整性通过剔除一部分序列但是保留该基因in frame读码框正确,

这样的情况可能产生domain negative效应;不保留完整性则打乱原基因读码框,使

得细胞产生non sence mediated decay而降解该基因mRNA,进而不产生该基因编码产物。

这几种方法的原理以及操作不太一样,严格来说,目的也不完全一样。

问题二:转基因小鼠和基因敲入小鼠的区别

转基因是过表达原有基因或者新表达原来没有的基因。 knockin是改变原有基因的表达,基本上是做突变,但是不破坏原有基因的完整性, 但是改变该基因的功能。 而knockout是敲除该基因,即是原有基因失活,其中又有保留原基因部分完整性和 不保留两种, 保留完整性通过剔除一部分序列但是保留该基因in frame读码框正确, 这样的情况可能产生domain negative效应;不保留完整性则打乱原基因读码框,使 得细胞产生non sence mediated decay而降解该基因mRNA,进而不产生该基因编码产物。 这几种方法的原理以及操作不太一样,严格来说,目的也不完全一样。

问题三:转基因超级鼠的原理是什么?

转基因鼠: 先获取大鼠的生长激素基因,在细胞外与运载体结合,形成重组DNA,再导入到小鼠的受 精卵中,成功表达后,小鼠长成超级小鼠,块头倍儿大,威猛无比。 其原理是 基因骸结构和功能。操作技术:基因工程技术,也叫 重组DNA技术。

问题四:转基因鼠与嵌合鼠有什么区别?

嵌合体是不能遗传的,转基因鼠是可以遗传的,一般做转基因或条件性敲除,首先唬到的是嵌合体,也就是你转的东西没到生殖细胞里,然后才能筛选得到真正的转基因鼠。

问题五:转基因鼠是无性生殖还是有性生殖?

转基因超级鼠,是在普通鼠的核尚未融合的受精卵注射大鼠的生长激素基因,再使受精卵内的卵细胞核或精子核结合,这样才能使其中携带着转入的基因.转基因鼠比与它同胎所生的小处生长速度快两到三倍,体积大一倍.转基因超级鼠与普通鼠对照,表明基因决定性状.因此,转基因超级鼠不是通过无性生殖的方式获得的.

问题六:转基因超级鼠是怎么来啊

人类克隆的

问题七:基因敲除小鼠和转基因小鼠的区别

基因敲除小鼠已经成为现代生命科学基础研究和药物研发领域不可或缺的实验动物模型,在生命科学、人类医药和健康研究领域中发挥着重要的作用。基于胚胎干细胞的基因打靶技术、EGE技术(基于Crispr cas9技术)是当下比较火热的基因敲除小鼠制备技术。利用这两种技术制备基因敲除小鼠的流程是什么样的? 一、 基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠的流程: 1. 课题设计,订购课题BAC菌; 2. 按照课题设计,完成打靶载体设计和构建; 3. 将重组载体电转到胚胎干细胞中,用G418筛选转染后的胚胎干细胞,得到阳性克隆; 4. 进一步通过PCR和southern blot杂交技术(基因敲除小鼠检测金标准)对上一步得到的阳性克隆进行筛选,得到稳定整合外源基因的胚胎干细胞阳性克隆; 5. 将胚胎干细胞阳性克隆注射到小鼠囊胚中,并植入到假孕小鼠的子宫内; 6. 得到嵌合鼠,并获得F1阳性杂合子小鼠。 基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠是目前为止唯一一个可以满足几乎所有基因组修饰要求的打靶技术,但目前只应用在小鼠的基因敲除上,而且其周期长工作量大。 二、 利用EGE技术(基于Crispr cas9技术)制备基因敲除小鼠的流程 1. 设计构建识别靶序列的sgRNA; 2. 设计构建致靶基因切割的EGE系统载体质粒; 3. 利用百奥赛图自主开发的UCA试剂盒对sgRNA/Cas9进行活性检测; 4. 设计构建打靶载体; 5. 体外转录sgRNA/Cas9 mRNA; 6. 小鼠受精卵原核注射sgRNA/Cas9 mRNA和打靶载体; 7. 获得Fo代小鼠,利用PCR对Fo代小鼠进行基因型鉴定; 8. 获得F1代小鼠,利用PCR和southern blot杂交技术(基因敲除小鼠检测金标准)对F1代小鼠进行基因型鉴定。 虽然EGE技术(基于Crispr cas9技术)制备基因敲除小鼠看似比基于胚胎干细胞的基因打靶技术制备基因敲除小鼠流程繁琐,其实不然,EGE技术(基于Crispr cas9技术)系统构建简单,基因敲除/敲入效率高,速度快,可实现多基因、多物种基因敲除/敲入,最快2个月即可得到F0代阳性鼠,5个月得到F1F1代杂合子小鼠。

问题八:下面是转基因鼠的研制过程,请据图回答问题:(1)获得超级鼠采用了现代生物技术中的______技术.(2)获

(1)转基因技术就是把一个生物体的基因转移到另一个生物体DNA中的生物技术;该研究过程中,将大鼠生长激素基因吸入显微注射器中,在显微镜下将大鼠生长激素基因注入小鼠核尚未融合的受精卵内的卵细胞核中,是利用了转基因技术.(2)转基因超级鼠,是在普通鼠的核尚未融合的受精卵注射大鼠的生长激素基因,再使受精卵内的卵细胞核或精子核结合,这样才能使其中携带着转入的基因.因此属于有性生殖.(3)生物体的形态特征、生理特征和行为方式叫做性状,在这项研究中,被研究的性状是鼠的个体大小,通过超级鼠产生的过程可知,控制鼠的个体大小的是大鼠生长激素基因.(4)超级鼠体量增大(体量大小是一种性状)是大鼠生长激素基因作用的结果,由此得出基因控制性状的结论.故答案为:(1)转基因 (2)有性(3)鼠的个体大小; 大鼠生长激素基因 (4)基因控制性状

问题九:如图1是“显微注射转基因超级鼠实验”示意图,图2是一胎所生的两只长大的幼鼠(其中左鼠为转基因超级鼠)

(1)图示中显示,在这项研究中,被研究的性状是鼠的个体大小,控制这个性状的基因是大鼠生长激素基因.(2)注入大鼠生长激素基因后,生出的幼鼠可发育成转基因超级鼠,该实验说明,生物的性状是由基因控制的.(3)性状是不能直接传递给下一代的,亲代传给下一代的是控制性状的基因而不是性状本身.(4)由遗传物质决定的变异是可遗传的变异,转基因超级鼠是由遗传物质的改变引起的,因此会遗传给后代.故答案为:(1)鼠的个体大小;大鼠生长激素基因;(2)基因控制(决定)生物性状;(3)基因;(4)会.

问题十:如何选择转基因小鼠的报告基因

做小鼠胚胎发育的研究人员一般喜欢用LacZ,也就是将LacZ置于一个启动子的调节之下。用LacZ可以进行胚胎全身染色(whole body staining),这样可以了解一个基因在体内的表达谱全貌。如果做细胞跟踪,比如免疫细胞,神经细胞等,一般喜欢用荧光蛋白。这样一是容易对细胞进行分离(比如FACS)和体外分析,二是容易对分离的细胞进行体内追踪(比如Adoptive transfer)。早些年用的最多的是EGFP和EYFP。有的时候,我们需要将两种不同的reporter小鼠交配在一起,研究两个基因的关系,这时可以将两个基因采用不同的荧光蛋白进行标记,也就是做两种不同的模式小鼠。因为早期大家多是用EGFP,现在可以多做一些其它荧光蛋白的报告基因小鼠,以便跟以前研发的EGFP小鼠结合起来研究。 zsGreen和EGFP, EYFP都是绿色荧光。EGFP和EYFP很难区分开。zsGreen是一个比较稳定的绿色荧光蛋白。DsRed和TdTomato都是红色荧光。这两种荧光蛋白都有报告基因模式小鼠发表。TdTomato是一个信号非常强的荧光蛋白,目前已经有报告基因小鼠发表,对细胞/小鼠也没有明显的毒性。相信以后会有越来越多的小鼠用TdTomato来做报告基因。虽然mRFP和mCherry是两个非常好的荧光蛋白,但由于它们需要584nm的激发光,所以一般的FACS仪器不能检测到信号,需要用到LSRII这样的仪器,而很多实验室可能没有这样的仪器。也有用EBFP, ECFP做细胞实验的,但用到小鼠上的比较少。比如需要用到紫外光来激发。如果想在一个小鼠里表达两种荧光蛋白,最好是用两种分得比较开的,比如,最好不要同时用EGFP和EYFP。HuCD2和Thy1.1是细胞表面受体。HuCD2因为去掉了C-term序列,使得其失去了信号传导的功能。那什么时候会用这两种分子呢?比如我们想研究一个细胞内蛋白基因(比如转录因子)的功能,经常需要把表达这个蛋白的细胞分离纯化出来。这个时候可以将HuCD2或Thy1.1报告基因放置在这个细胞内蛋白基因启动子下(比如加一个IRES-Thy1.1), 这样所有表达这个细胞内蛋白的细胞都会在细胞表面表达Thy1.1。这样就可以用anti-Thy1.1抗体将这一群细胞分离出来,进行后续研究。当然也可以用anti-Thy1.1抗体进行组织切片的免疫荧光检测。HA、FLAG、Biotin等是细胞和生化实验中常用的标签多肽或蛋白。在Western blot,免疫沉淀(Immunoprecipitation)等实验中经常用到,因为有非常特异的HA、Flag抗体。Biotin可以跟生物素(Streptavidin)直接结合并用于免疫沉淀。在模式小鼠中,这些标签多肽或蛋白可以与要研究的蛋白做成融合蛋白。这种模式小鼠最常被用到的是Chip-chip实验。比如要研究一个转录因子的功能,就需要知道这个转录因子在细胞内(正常或刺激条件下)结合到染色体基因组DNA的位置以及结合序列。我们知道,特异性好、亲和力高的抗转录因子的抗体非常不容易得到或制备。这个时候可以将标签多肽(比如FLAG)放在转录因子的C-term,做成融合蛋白。刺激细胞之后,对细胞进行化学交联,并破碎细胞以及基因组DNA,然后用anti-FLAG抗体作免疫沉淀,将转录因子沉淀下来。最后分析这些转录因子所结合的DNA片段序列,从而找到该转录因子的在基因组上的识别序列,也就找到了该转录因子的作用基因。荧光素酶做报告基因模式小鼠,一般是为了做活体成像实验。比如在一个......余下全文>>

字典词典中秋节怎么写中秋节怎么写【范文精选】中秋节怎么写【专家解析】西餐厅圣诞节活动西餐厅圣诞节活动【范文精选】西餐厅圣诞节活动【专家解析】土耳其凯末尔革命土耳其凯末尔革命【范文精选】土耳其凯末尔革命【专家解析】